期刊简介

               1981年创刊,中华医学会、河北医科大学主办。本刊原名国外医学呼吸系统分册,系医学科技期刊,中华医学会系列刊物之一。办刊宗旨:贯彻、执行国家的政策法规和规范标准,坚持理论与实践、普及与提高相结合的原则,促进国内、外学术交流。报道内容:介绍国内、外呼吸疾病的新动态、新成果、新技术和新经验。主要栏目:诊治指南、专家述评、专家共识、专家笔谈、论著、综述、继续教育、呼吸介入、研究报道、专题讲座、临床经验、病例分析、病例报告、病例讨论、呼吸读片等。读者对象:呼吸科、急诊科、ICU、小儿科、老年科、胸外科、微创治疗中心、睡眠中心、变态反应科的医师和护士,以及从事呼吸领域基础研究和临床研究的科技工作者。                

首页>国际呼吸杂志
  • 杂志名称:国际呼吸杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中华医学会 河北医科大学
  • 国际刊号:1673-436X
  • 国内刊号:13-1368/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:河北省优秀期刊期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 维普收录(中)
国际呼吸杂志2016年第17期

KLF4在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞增殖及表型转化中的作用初步研究

聂欣;施熠炜;张爱珍;杜永成

关键词:肺动脉, 平滑肌, 细胞低氧, 细胞分化, 细胞增殖, KLF4
摘要:目的:本实验通过观察低氧诱导大鼠原代肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cell,PASMC)增殖与分化标志改变过程中,krǖppel 样因子4(krǖppel-like factor 4, KLF4)表达的变化,并检测 KLF4过表达对该过程的影响,探讨 KLF4是否在其中担当一定作用。方法采用贴片法培养原代 PASMC,低氧(5%O 2)培养24 h、48 h、72 h 后,以正常氧浓度培养细胞为对照,采用实时荧光聚合酶链反应(real-time PCR)、Western blot 及免疫共沉淀方法,观察低氧24 h、48 h、72 h,PASMC 中 KLF4乙酰化水平及表达水平的变化。cck-8检测细胞增殖情况,碘化丙啶(PI)染色检测细胞周期,提取细胞总 RNA 和蛋白,采用 real-time PCR、Western blot 方法检测细胞中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平,综合分析低氧对细胞增殖的影响,同时采用 real-time PCR、 Western blot 方法检测 PASMC 分化标志物平滑肌肌动蛋白α(smooth muscleα-action,SMα-actin)的表达水平。通过转染 KLF4表达质粒,提高 PASMC 中 KLF4的表达水平,检测细胞周期、增殖活力及 PCNA、SM α-actin 的变化,观察低氧下 KLF4过表达对PASMC 增殖、分化的影响。结果低氧24 h,PASMC 中 KLF4表达水平均较常氧培养细胞明显增高,期间 SMα-actin 表达较常氧培养细胞明显减少,PASMC 增殖不明显。随后 KLF4表达水平逐渐降低,至72 h 降低至正常水平,而 SMα-actin 逐渐增高,同时 PASMC 增殖活力明显增强,S 期细胞逐渐增多。KLF4过表达后,低氧刺激 PASMC 增殖活力明显降低,SMα-actin 表达水平也降低,细胞阻滞于 G1期。结论低氧诱导 PASMC 发生去分化与增殖不同步;KLF4参与调节低氧诱导的PASMC 表型转化与增殖过程,该作用涉及 KLF4乙酰化水平改变。